长pcr引物设计以及扩增条件

来源：学生作业帮编辑：搜搜做题作业网作业帮分类：综合作业时间：2024/05/10 03:57:03

长pcr引物设计以及扩增条件
我有个环状的大概35kb的基因组需要全部扩增.我想分几段来扩增,每段大概5000-8000bp左右吧.本人有takara公司的la-taq体系,需要怎样设计引物啊?有哪些原则,有这方面的专家吗?

引物长度和专一性
常见的引物长度为18-30个碱基.短的引物（≤15碱基）能非常高效地结合,但是它们的专一性不够.较长的引物能提高专一性,然而退火效率低,从而导致PCR产量低下.同时应避免编码单一序列和重复序列的引物.
平衡GC含量,避免GC-和AT-富集区域
引物的GC含量应介于40%～60%之间.应避免聚-（dC）-或聚（dG）-区域,因为它们会降低退火反应的专一性.聚-（dA）-和聚（dT）-也应避免,因为这样会形成不稳定的引物-模板复合物,从而降低扩增效率.

长pcr引物设计以及扩增条件 pcr扩增中,如何设计引物? microRNA的茎环引物及其PCR扩增的上游引物怎么设计? 在进行PCR实验扩增时如何设计引物?为什么要用引物?原理是什么? PCR产物测序问题.我用简并引物扩增未知基因.设计了几对引物.都出现了目的条带.发现其中两对引物的产物长度比较长.因为我 pcr 如果把全部模板DNA扩增出来,引物怎么设计 PCR扩增时,序列AT含量太高如何设计引物? 如果要使用PCR扩增一段已知的DNA序列,要如何设计引物 PCR在扩增长片段的设计引物时需要注意什么? 怎么样设计pcr引物 pcr引物怎么设计 PCR引物设计