高效液相色谱法是紫外光谱法吗?

来源：学生作业帮编辑：搜搜做题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/05/12 12:28:28

高效液相色谱法是紫外光谱法吗?

不是.高效液相色谱法原理是利用物质的极性不同,而导致与固相柱内填料的结合能力不同,然后在一定的流动相中从柱上洗脱下来的时间不同,来达到分离物质的一个目的.高效液相色谱既可以说是一种物质的分离方式,也可以说是一种物质的检测方式,因为它本身能同时达到这两个目的.对于高效液相色谱,物质的洗脱时间（也叫做滞留时间）是一个重要的检测指标,另外一个重要的检测指标则是物质的光谱.高效液相色谱的探测头实际上是一个紫外光谱扫描探头,它对从色谱中随着流动相流出的物质进行实时的光谱扫描.严格来说,从高效液相色谱中分离的物质与标准物质具有同样的滞留时间和紫外光谱的话,才认为是同一物质.不过一般在检测完标准物质后,确定它的吸收波长,然后再检测样品的话,同样的滞留时间和吸收波长的也可以认为是同一物质.
紫外光谱法其实是非常简单的,原理是任何物质的溶液都会在某一特定的紫外波长下有一特异的吸收波长,如果用紫外分光光度计对物质的溶液进行一个波长扫描,那么在它的特异吸收波长附近就会形成一个峰形的曲线,这个曲线的最高点就是该物质的特异吸收波长.如果以吸收值作为纵坐标,波长作为横坐标的话,波长与吸光值对应的曲线就是物质的紫外光谱了.对于单一的物质而言,紫外光谱是特异的,所以对于同样的物质,那么它肯定具有相同的紫外光谱.
但是,如果检测溶液是混合物的话,那么紫外光谱法就显然不能用了.这就是高效液相色谱和紫外光谱法的区别了,高效液相色谱实际上就是在紫外光谱前多了一道程序,这就是将不同物质分离的程序,然后将分离的单一物质进行紫外光谱检测分析.当然,有些人比较懒或者机器不行的话,就只检测物质的最高吸收波长,而不进行波长扫描了.

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