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为什么菌液PCR 引物一个载体上的 一个是PCR片段上的 鉴定正确后 测序却完全不同?信号中断?

来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/09 12:35:56
为什么菌液PCR 引物一个载体上的 一个是PCR片段上的 鉴定正确后 测序却完全不同?信号中断?
另一次PCR是原片段引物的,也是正确条带;
回答假阳性的都扯淡,是菌里构建好的载体模板不纯?肯定有正确的连接,但是不是混有其他的条带?同样的情况,另2个菌液测序就正确~
为什么菌液PCR 引物一个载体上的 一个是PCR片段上的 鉴定正确后 测序却完全不同?信号中断?
是定向克隆粘末端连接?如果不是有连接反了的可能 再有一种可能就是送去测序的菌液有问题 我有次是同样的片段测序,菌液没出来,用测序引物PCR的产物测序就合适了,可能菌液污染了