搜搜做题作业网PGEX系列表达载体的特点
来源：学生作业帮 编辑：搜搜做题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/11 16:52:41
PGEX系列表达载体的特点
我在用其他载体做表达的时候出现了一点问题,有人建议我用pegx系列的载体试一试,请问一下PGEX 系列表达载体有什么特点,
在原核中表达，我设了5个iptg浓度，以及4个时间梯度，都没有成功表达，所以想用另外的载体分析一下。
我在用其他载体做表达的时候出现了一点问题,有人建议我用pegx系列的载体试一试,请问一下PGEX 系列表达载体有什么特点,
在原核中表达，我设了5个iptg浓度，以及4个时间梯度，都没有成功表达，所以想用另外的载体分析一下。
pgex特点就是带有GST标签,可以增加目的蛋白的溶解度,别的没什么特点,属于大众型载体,目前也较常使用.你说的没有表达有没有做全菌的sds-page啊,不管是不是形成包涵体全菌电泳都应该有条带,至于形不形成包涵体就取决于你的iptg浓度和诱导温度了,iptg越低,温度越低可溶性越好,我们曾做过0.1的iptg,4度诱导过夜的.因为pgex载体是不能变性复性的,因为GST标签的活性会发生改变.如果是全菌都没有表达,首先检查是不是你插入序列的问题,排出后看看是不是稀有密码子的问题,真核基因在原核细胞中表达会受到大肠杆菌稀有密码子的影响,网上有分析软件.如果稀有密码子比较多可以使用rosetta菌株来表达,应该能出来的,只要不是你序列的问题,没有出不来的蛋白,只是溶不溶,有没有活性的问题.