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waters色谱柱 出峰变成双峰 要怎么解决?

来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/28 05:06:29
waters色谱柱 出峰变成双峰 要怎么解决?
色谱柱:waters symmtry cloumn ,5um,250mm
流动相:乙腈-0.1%磷酸-十二烷基磺酸钠(50 :50 :0.1g)
盐酸小檗碱对照品浓度为 0.1ug/ul ,进样10ul ,第一针正常,出峰时间6min,15分钟后进的第二针,第二针峰形出现严重肩峰,第三针峰形分叉(双峰)
用流动相平衡很久也试了,甲醇冲过夜也试了,95%的水冲过夜也试了,用纯甲醇(0.2ml/min)反冲2h也试过了,现在柱子进标准品还是双峰,还有救不?要怎么解决?
waters色谱柱 出峰变成双峰 要怎么解决?
你观察到的现象时,是否发现柱子压力变化?塔板数是否发生了变化?
(1)如果这两个都没变化的话,你用waters symmtry cloumn ,5um,250mm这根柱子做其它的实验试试,如果做其它的都没问题的话,基本可以排除柱子问题;
(2)如果压力和塔板数发生了变化的话,就说明柱子出问题了,具体什么问题就要一个一个的排除,可不可以挽救,要根据你柱子问题的严重程度来决定.
再问: 换做其他物质也是这样,压力有点高呢。
再答: 那估计是你的柱子出问题了,压力的高的话,建议你可以把进柱子端的筛板下下来(注意要很小心,不要把填料带下来了),用纯化水超声后换用甲醇超声,处理后再上回去,看看情况会不会改善。 如果筛板上有东西堵住了的话,压力会升高,柱效会下降,有可能会出现峰分叉。