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将目的基因导入动物细胞时,为什么先将含有目的基因的表达载体提纯,并使DNA浓度保持在1~3μg/mL

来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/01 23:55:48
将目的基因导入动物细胞时,为什么先将含有目的基因的表达载体提纯,并使DNA浓度保持在1~3μg/mL
为什么要提纯,不已经含有目的基因了吗?DNA浓度是怎么回事,变成DNA溶液了?为什么有液体?
将目的基因导入动物细胞时,为什么先将含有目的基因的表达载体提纯,并使DNA浓度保持在1~3μg/mL
如果你是高中生,先这么记着吧,应该还没有高考考这么高级的.
如果你是大学生,那么是这样的:
含有目的基因的表达载体在感染细胞之前,需要进行扩增,然后再提取载体.在这个过程中,载体经常会受到蛋白或者有机溶剂等的污染,而这些东西对于细胞是由毒害的,所以在感染细胞之前,要先除去载体中的这些杂质,就是纯化这一步.
DNA(就是质粒载体)是溶解在水溶液或者buffer中的,然后与转染试剂混合,才能感染动物细胞,不然只是加入DNA是没有用的.
如果你已经大学毕业,并且从事这一方面工作,那我就班门弄斧了:
不是所有的纯化试剂盒提取的质粒都可以达到很好的转染效果,需要不断地尝试和更换不同的试剂盒和抽提方法,选择最好的才行.
在动物细胞转染时,DNA的浓度也是摸索出来的,DNA也有细胞毒性,而且不同的转染试剂用量是不同的.