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形成重组DNA分子的过程中,必须用同一种限制酶切割目地基因和载体

来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/28 16:57:29
形成重组DNA分子的过程中,必须用同一种限制酶切割目地基因和载体
为什么要同一种限制酶啊?谢谢!
形成重组DNA分子的过程中,必须用同一种限制酶切割目地基因和载体
其实用同一种限制酶(单酶切)分别切割目的基因与运载体是最简单的一种方法,因为切割后能产生相同的粘性末端,末端之间能发生碱基互补配对而形成重组DNA分子,操作简单,但连接后会出现两种不需要的连接方式:目的基因——目的基因(环状)、质粒——质粒(环状),这样就加大了筛选工作量.所以也可用两种不同限制酶(双酶切)分别同时切割含目的基因的DNA片段和质粒,可以防止目的基因与质粒自身连接体的发生,克服单酶切的缺点,但由于每种限制酶作用的条件不同,一般不能两种酶不能同时使用,而是用完一种就要更换作用的外界条件,以保证酶的高效性.因此双酶切操作较复杂.