有现成的质粒,无原始的菌种或菌液,如何对质粒进行扩增?
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/04/19 19:38:51
有现成的质粒,无原始的菌种或菌液,如何对质粒进行扩增?
目的基因先后连接到T载体和表达载体之后,接种到培养液中,培养液在摇床上培养12-16h后提取的质粒.
现在质粒快用完了,但是目的基因、原始菌种、菌液等一切原材料都没有了,只有10μL左右的质粒(用Elution Buffer)保存的,怎么进行扩增呢?
目的基因先后连接到T载体和表达载体之后,接种到培养液中,培养液在摇床上培养12-16h后提取的质粒.
现在质粒快用完了,但是目的基因、原始菌种、菌液等一切原材料都没有了,只有10μL左右的质粒(用Elution Buffer)保存的,怎么进行扩增呢?
我用的感受态细菌DH5α,将质粒转入感受态中,涂到培养基上,在长出细菌后挑克隆到培养液中摇,再抽出来送去测序就好了,具体详细步骤有点麻烦
再问: 质粒时间保存时间有点长,已经好几年了,活性不是很好,我们自己做的DH5α质量也不是很好,质粒导入效率有点低,担心涂布不长菌。
这是唯一的方法吗?虽然这就是我们一直用的方法,但还是想问这一句。
再答: 我也是一直用的这个方法,不过,我的质粒都可以做出来,实在不行只能重做了
再问: 质粒时间保存时间有点长,已经好几年了,活性不是很好,我们自己做的DH5α质量也不是很好,质粒导入效率有点低,担心涂布不长菌。
这是唯一的方法吗?虽然这就是我们一直用的方法,但还是想问这一句。
再答: 我也是一直用的这个方法,不过,我的质粒都可以做出来,实在不行只能重做了
如何区分质粒与质粒的复合体和质粒与目的基因的复合体
转化后的重组子进行PCR,扩增出来的是目的基因还是整个质粒?为什么DNA测序是在转化后才进行?
常用的质粒载体有哪些
只有细菌里有质粒吗?质粒是DNA还是RNA?原核生物的遗传物质都是质粒吗?
质粒是载体,被质粒植入的细菌或病毒属于载体吗?
关于质粒的错误叙述“细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的”如何更正?并说明原因?
载体和质粒的区别?载体与质粒的概念有什么不同?
对PCR扩增后的目的基因如何进行提取
标记基因的作用质粒上有两个或两个以上标记基因的作用是什么?
质粒的定义及质粒的生物学功能
请问HEK293细胞如何将质粒转染进去,有没有具体的步骤?我有lipo2000
分散质粒子的组成