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有现成的质粒,无原始的菌种或菌液,如何对质粒进行扩增?

来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/04/19 19:38:51
有现成的质粒,无原始的菌种或菌液,如何对质粒进行扩增?
目的基因先后连接到T载体和表达载体之后,接种到培养液中,培养液在摇床上培养12-16h后提取的质粒.
现在质粒快用完了,但是目的基因、原始菌种、菌液等一切原材料都没有了,只有10μL左右的质粒(用Elution Buffer)保存的,怎么进行扩增呢?
有现成的质粒,无原始的菌种或菌液,如何对质粒进行扩增?
我用的感受态细菌DH5α,将质粒转入感受态中,涂到培养基上,在长出细菌后挑克隆到培养液中摇,再抽出来送去测序就好了,具体详细步骤有点麻烦
再问: 质粒时间保存时间有点长,已经好几年了,活性不是很好,我们自己做的DH5α质量也不是很好,质粒导入效率有点低,担心涂布不长菌。

这是唯一的方法吗?虽然这就是我们一直用的方法,但还是想问这一句。
再答: 我也是一直用的这个方法,不过,我的质粒都可以做出来,实在不行只能重做了