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RNA提取质量不好,做RT-PCR,提的RNA质量不好,260/280只达到1.6多,浓度两微升测的9.1左右,用TRI

来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/06/23 19:36:22
RNA提取质量不好,
做RT-PCR,提的RNA质量不好,260/280只达到1.6多,浓度两微升测的9.1左右,用TRIZOL提的,按步骤来的,不知道是哪个环节出了问题,或者提一点经验性的建议,
还有,是不是最后必须用乙醇洗涤啊?我没做这步~
水浴重要不,听别人提的时候没有水浴的~
RNA提取质量不好,做RT-PCR,提的RNA质量不好,260/280只达到1.6多,浓度两微升测的9.1左右,用TRI
水浴相当重要
能使裂解液与磨碎的样品充分的接触
使细胞膜破碎释放出核酸
时间还要够并且水浴过程中要不断的振荡
而且最后一步洗涤也非常重要
乙醇主要洗去盐离子等杂质
你OD值低正是因为杂质比较多
一般按步骤来不会出问题
提取过程当中注意RNA的降解
尽量是提RNA的专用设备包括枪
提的过程始终是在超净台中
枪头溶液等都要用DEPC处理