PCR一步法和两步法有什么区别吗?
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/28 02:03:04
PCR一步法和两步法有什么区别吗?
其实一步法并非是两步法的改进,根据实验目的不同,有时两步法会更好.举个例子,如果想对同一样本同时扩增2个以上的基因,那么一步法是从RNA开始的, 即分别取相同量的RNA,然后逆转录,然后加入不同的primer PCR,方法固然简单,但逆转录酶很贵.如果两步法,可将RNA逆转录为cDNA,然后每次加入相同量的cDNA,再加不同的引物PCR,这样可比性强, 而且不需逆转录,直接PCR即可.当然,如果想快速获得某一种基因,当然一步法好.所以一步法和两步法各有优点,不能一概而论.
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