菌种纯化与复壮问题.菌种纯化只得是菌种的分离.但是在纯化的过程中真菌会繁殖很多代会不会有老化的问题呢?如果发现一株拥有优

菌种纯化与复壮问题.
菌种纯化只得是菌种的分离.但是在纯化的过程中真菌会繁殖很多代会不会有老化的问题呢?如果发现一株拥有优良性状的菌种,能不能通过不断的继代培养得到稳定优良性状的菌株呢?这个不断的继代是不是不断的复壮操作呢?植物可以用花药培养单倍体,然后秋水仙素获得稳定的纯合子,真菌有类似的方法吗?

真菌（以酵母为例）当然也存在复壮问题.一株酵母菌在多次繁殖后,会产生老化现象.需要复壮.老化现象一般表现是对数生长期不明显,曲线过于平缓；菌密度下降明显；稳定期短；产物产生量下降等.
酵母菌的复壮其实也是分离纯化培养,只是要把遗传性状稳定、生长良好的菌挑选出来.一般不用秋水仙素等,因为这类物质很容易造成菌种不可逆变异,导致菌种无法继续使用.
复壮的步骤一般是这样的.
将菌种在全营养培养基中液体培养,进入对数生长期后（时间不要太长,否则会繁殖过度）,做较大批量的稀释平板.观察菌落生长情况,挑选生长优势菌落（长得快、长得大）,检测其某方面的生理功能,如发酵力、产酸、产酶等.此过程重复进行,综合考虑生长优势与生理功能优势,直到得到生长强壮、生理功能满意的菌株.
一般一次复壮会多挑选几支进行对比选择,也会多留下几支,以备不时之需.
再问： 但是复壮的过程也是不断的自交啊？而且从种子到一级种。二级种这个过程中不会老化吗？这个时间也不短吧？真菌也会繁殖好几代了吧？你没办法确定你得到的纯化后的菌种就是纯合子吧？
再答： 复壮时所挑选的菌落是由单个菌繁殖而来的，从摇瓶菌种到一、二级种子，不管繁殖多少代，也不管是否有过自交，其基因型是相同的。 如果在扩大制种时还要考虑菌种的老化，那还怎么使用啊。
再问： 单菌繁殖意味着菌种不老化吗？我看到很多种天麻的蜜环菌也是从种子繁殖来的，但是繁殖一年以后菌种就老化了啊？
再答： 肯定会老化的，否则何来的复壮一说。除了癌细胞，还没有发现不会老化的细胞或生物。 但就真菌来说，在不断繁殖的过程中，总会有一些细胞能够保持住活性。而所谓的复壮，也不过是把这样的细胞挑选出来。 至于蜜环菌，我没有多少了解，但一定也有复壮或保持其活性的办法，否则持续的老化，就只能到自然界中去找菌种了，人工就无法延续培育了。是不是呢？
再问： 那是不是可以这么理解一级种和二级种乃至生产种在活性上的差别不大呢？
再答： 制作种子是单纯增加数量，营养条件是最好的，在这样的环境中，菌种“吃的好、喝的好、呼吸顺畅”，不会很快老化。而到生产时，一般都会限制某一方面的营养条件，以改变菌种的代谢方式、代谢路径或生长阶段。营养受到限制，菌体就会快速老化。
再问： 是这样啊？有点明白了。可是我看到的文献说老化的原因是在于菌种是同一基因型繁殖出来的。所以有些隐性的基因会不断的表达出来。比如Aa这种几代之后优良性状就没有了。植物就是花药培养a或者是A然后秋水仙素培养。得到AA或者是aa。分离出优良性状不知道真菌有没有这类的方法？
再答： 真菌也有这种情况。某些具备所需要性状在菌种使用一段时间后，就逐渐退化了。所以才需要使用保藏菌种接替，或进行复壮，把没有退化的菌挑选出来。 我没用过秋水仙素，但我用过亚硝基胍，吓死人了，那东西强致癌。
再问： 这个是诱变的貌似不是培育纯合子用的。那么理论上是不是不断的复壮之后。菌种的优良性状保持的时间可能会延长呢？
再答： 从道理上说是这样的。但也要考虑意外情况。如复壮的效果不好等。这就需要在复壮效果好时，把具有优良性状的菌株多保留下来一些，作为储备，以备不时之需。