DNA提取中核酸沉淀后为何要用洗涤液洗

来源：学生作业帮编辑：搜搜做题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/05/29 07:39:51

DNA提取中核酸沉淀后为何要用洗涤液洗

核酸是在高盐+乙醇或异丙醇的条件下沉淀的,沉淀中除了DNA还有不少的盐.如果不用洗涤液洗,残留的盐会影响以后的实验,如酶切、连接、PCR等.
再问：那CTAB是什么时候去除的呢？而且得到的DNA是不是DNA盐呢？
再答： CTAB在你分离水相的时候就基本上没有了。 DNA的磷酸基容易电离使DNA呈酸性，你在中性条件下得到的DNA肯定是DNA盐。不过放心，DNA盐中的阳离子所占比例极小，对DNA的各项性质没有影响。 DNA在酸性条件下容易降解，还是成盐后安全一些。
再问：冒昧再请教一下，CTAB不是与DNA结合起来的么？怎么会在分离水相的时候没了呢？它能溶于乙醇么？
再答：在高离子强度的溶液里，CTAB与蛋白质和大多数酸性多聚糖以外的多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸。在你分离水相的时候大部分的CTAB已经在两相界面上的沉淀物里了。 CTAB溶于乙醇，可以被洗涤除去。
再问： “在高离子强度的溶液里，CTAB与蛋白质和大多数酸性多聚糖以外的多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸”，那此时它和核酸形成复合物了么？盐是不溶于乙醇的，最后是融在乙醇溶液中的水里除去的么？最后残留的CTAB是溶在洗涤液中的乙醇中除去的么？感激不尽啊~~~
再答：形成复合物了盐是用70%乙醇洗涤时除去的。之所以选择这个浓度，是因为这个浓度的乙醇除盐作用好，DNA的溶解损失小，还能起到灭菌消毒的作用。盐不溶于乙醇这句话只适用于氯化钠（事实上还是微溶），但沉淀核酸用乙酸钠、乙酸铵的也不少，就不能这么说了。核酸上结合的CTAB在你用无水乙醇或异丙醇沉淀的时候就除去了。

怎样提取核酸中DNA,RNA SDS法提取dna过程中每次离心后dna是在上清液还是沉淀 DNA提取中加入无水乙醇,有明显的丝状DNA出现高速离心沉淀后DNA却不见了在DNA粗提取实验中用鸡血细胞液加水胀破过滤后为何又加入2mol/L氯化钠后又为何还要倒入蒸馏水? 我用DNAiso Reagent提取肌肉DNA,加入无水乙醇后,出现白色云雾状沉淀（应该是DNA）,可是在最后洗完（75 DNA电泳没有图像昨天使用CTAB法提取植物的DNA,提取过程中能看到沉淀,但是稀释溶解后,电泳看不到任何条带,而且电泳 DNA分子杂交技术中为何要用到限制性核酸内切酶?DNA杂交技术的过程又是怎样的? 请问：提取DNA时洗涤沉淀为什么要用70％的乙醇? DNA电泳没有图像昨天使用CTAB法提取植物的DNA,在提取过程中能看到沉淀,但是提取结束后进行的电泳看不到任何东西,只提取DNA中最后一步用70％的乙醇洗涤沉淀时,是如何操作的?是不是要摇晃混匀,再去离心几分钟? 用宝生物DNA/RNA试剂盒提取核酸时,加入1%冰乙酸异丙醇的作用是什么? 提取DNA时70%乙醇洗涤沉淀,