搜搜做题作业网Taqman探针需要做溶解曲线吗?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/07 04:44:44
1,检查引物探针的特异性等2.检查所用模板质量数据核查的话主要看你所测得的数据是否跟你的理想状态差距很大,或数据是否符合常理.再就是看数据得看下相关系数和扩增效率.
朋友,首先跟你说一下我的经验,其实这里有个误区,其实普通PCR对RealtimePCR的指导意义实在是太小,因为realtimePCR的引物跟普通PCR的引物有很大差别,realtimePCR的引物因
这要看你用什么做空白.若是用水来调零,曲线过原点是因为你的对照吸光值为o.一般情况下,即使对照也有吸光值,所以用水来调零,一般标线不会过原点的.若是用不加蛋白的反应液调零,理所当然,你的O蛋白的点就是
同一次试验做一次标准曲线就够了啊.如果换人或者隔一些天有条件变动什么的,如果你有条件和时间的还是再重做个吧.
不是你的质粒问题就是你的引物、探针的问题可能是引物或探针降解了
需要用7块板.因为做的MTT之后,这块板就污染了,不能继续培养细胞了.
基因探针就是核酸探针是一段带有检测标记并且序列已知的与目的基因互补的核苷酸序列.再问：能说具体点吗再问：作为填空题怎么答
你说的TL988是国产的天隆PCR仪器吧?那个仪器很烂的,千万不要买,建议买ABI7500,或者安捷伦的MXP3005,或者伯乐的,eppendorf的,都可以,基本上都是96孔4～5通道的.现在36
问题有可能如下：1）模板制备有问题.你可以用普通PCR扩增,然后电泳确定是不是模板有问题?2）引物问题：引物设计的好与否,对Realtime结果至关重要!可以用普通PCR确定你的引物扩增效率如何?模板
是RNA探针.TaqMan荧光探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5’末端,而淬灭剂则在3’末端.PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被
探针是一小段单链DNA或者RNA片段,用于检测与其互补的核酸序列.双链DNA加热变性成为单链,随后用放射性同位素（通常用磷-32）将其标记成为探针.磷-32通常被掺入组成DNA的四种核苷酸之一的磷酸基
溶解曲线分析可以用来确定不同的反应产物,包括非特异性产物.扩增反应完成后,通过逐渐增加温度同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线,随着反应中双链DNA变性,荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低,用
可以看看有几个峰,以及峰出现的位置.每个峰代表有一种产物,如果有两个峰甚至多个峰,说明引物不特异,你得到的Ct值是不可信的.还有如果出现峰的温度低,很可能是Dimer,而不是你的目的产物.如果你相同样
对这个是必须的.再问：那每次做的标准曲线的差异怎么去评价呢？差异在什么范围内可以呢？谢谢再答：必须的每次都做做标准！
不需要完全符合等差数列的.你说说看相关系数R2和扩增效率E的结果怎么样,之后再考虑调整体系和qPCR程序.
引物特异性不好,或者是模板有污染吧.
染料法的?大概引物特异性不好,有杂带或者二聚体,把反应板里的样跑个胶看看是不是,是的话就换引物吧
因为目的基因为dsDNA,mRNA与其中的一条DNA单链可以杂交.再问：可否具体描述一下过程呢？不是很清楚啊～再答：就像DNA-DNA双链一样，形成DNA-RNA杂交分子
用光分布曲线测试仪可以测出来呀.如果是光学设计的话,需要用专业的软件去模拟设计.
探针附带的说明单子上有说明的,有说加多少灭菌水或TE可以变成100uM的母液