搜搜做题作业网PCR引物要跨内含子吗
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/28 13:54:30
同楼上,当初我问老师这个问题时,他说大学才学这么深
因为RT-PCR的模版是单链的RNA,一种引物就够了,而常规PCR的引物是双链DNA,需要上下游引物从两端同时扩增.
你理解的没错.上下游引物同时用才能特异性扩增中间的那部分片段.
在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列.在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,
用PP5.0或oligo软件.网上有很多说明书的,操作十分简单再问：等于白说
关键就是这个引物的设计,如果你能设计好并且成功RT-PCR,那就没问题了.
实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间.同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能
体内DNA复制也是有引物的,你好好再看看课本吧.引物在PCR以及DNA复制中的作用就是起到引导DNA聚合酶结合和开始聚合反应的过程.
解题思路：在PCR技术中双链DNA分子中每条链都要和引物结合，进行复制。解题过程：解析：引物在PCR以及DNA复制中的作用就是起到引导DNA聚合酶结合和开始聚合反应的过程。因为PCR中，DNA聚合酶不
不需要复制,引物是配比好的,请看PCR的原理.
基本不是.当今发展出各色各样的PCR扩增技术,各色各样的高温聚合酶,就是来解决PCR扩增中遇到的扩不出、扩增效率低的问题.如巢式PCR就是扩增那些拷贝数很低的基因片段.有些重复片段的扩增,GC含量高的
引物若跨内含子的话,引物仅能以3'端的一小部分结合基因组DNA,这样的话Tm会很低.在较高的退火温度下,引物几乎无法和基因组DNA结合来引发聚合,而主要是与能够完全配对的cDNA结合并引发反应.
一般要20个碱基的长度,一对,要防止形成发夹.
用primerpremie
没事,这个可以,你应该是把设计的上下游引物都进行了比对,前两个比对结果应该就是上游、和下游引物,假设你第一个结果是上游,第二个结果是下游.那么第三个结果也就是下游比对结果,下游结合的位置距离上游、下游
不会脱落,因为引物的组分就是普通核酸,没必要让它再脱掉.PCR不像在生物体内一样,中没有那种降解酶H.要是有特殊要求的可能要脱.
模板大多数为一条,也可为多条,引物至少两个（三五处复制）启动与终止各一个为模板上公用.
一般来说,引物都是成对设计的,包括上游引物和下游引物；除非你设计出来的上游引物与下游引物相同,才可用单引物扩增.否则,若用单引物则只能扩出一条链再问：用单引物扩增出的产物跑电泳，在紫外灯照射下的条带是
那是显然的,所以在提rna做pcr的时候,如果里面混了基因组dna,那就有可能导致假阳性再问：谢谢，但是这不是我想要的答案。请问做半定量RT-PCR的引物怎么设计？可以设计在基因的非翻译区，然后扩非翻
如果设计在内含子序列中,RT-PCR检测到的可能是未被剪切的preRNA或RNA中污染的核DNA,如果设计在外显子序列中,RT-PCR检测到的可能是成熟mRNA,未被剪切的preRNA或RNA中污染的