cDNA 片段1000bp的体系

基因组文库含有全部基因序列cDNA文库由mRNA逆转录而来,无内含子及外编码区..

试试把退火时间延长一些,看能不能把两条链连上.一般就是照着引物的Tm值做就可以的.再问：退火时间是30S，应该足够了，对于退火温度能给个建议吗？我现在不加两端引物，先做Pool，看看能不能连，谢谢你的

基因组文库是指含有某种生物全部基因随机片段的重组DNA克隆群体　以生物细胞的总mRNA为模板,用逆转录酶合成互补的双链cDNA,然后接到载体上,转入到宿主后建立的基因文库就是cDNA文库.相比之下,c

每个marker都有个说明书的,上面有说明每个条带的大小.你对照说明书就好了

原来扩增的时候就有两条带,回收的时候（是凝胶回收吗?）可能因为产物浓度过大,导致两条带没跑开,让你一起切下来了（回收后电泳检测了没?）,所以连接后有两种克隆.至于说为什么会出现两种克隆,要具体问题具体

博凌科为-为你TakaraLATaq酶,体系同说明书.反应程序是：（要求引物Tm值在70度左右,但上下只能浮动2度.Primer5计算）No.ofCyclesTemperature(℃)Duratio

当然可以咯,不过我没明白为什么上游引物GCrich跟分两段扩增有什么关系,1.2K一次扩增是完全没有问题的,如果上游引物出现GCrich的情况,那么可以考虑在更加上游的地方设计引物啊,在这个基因外测的

1.首先这应该是个融合表达载体.应该考虑后面的读码框问题.就是应该适当在后面的酶切位点前加入0-2个碱基.使得你的目的基因和egfp在同一读码框内.2.KOZAK序列在真核细胞中表达有作用,这就看你后

冈崎片段是DNA双链复制时,由于一条链的方向正好是5'到3',而另一条要3'到5',所以在同一个DNA聚合酶的行进方向上出现前导链和后随链,后随链由于DNA聚合酶箍钳扭转方向之后的长度有限,所以是一段

1先根据部分序列设计一对引物验证一下序列是否正确（很确信就免）,需要的话克隆,有文库的话杂一下文库；2根据已知序列设计三条巢式引物,进行5’RACE,拿到5’序列；3同时设计巢氏引物,进行3’RACE

最好重新在反转录了,因为可能你的基因已经被你两次反转录富集了.虽然actin只有一条单带,但是你的PCR反应的循环数未知道,带的亮度也未知.

没连进去呗可能是最初的PCR就没扩增出来你要的条带调整下退火温度或者直接连T载体测序或者换对引物再问：直接连T载体测序，这个怎么弄？引物是别人设计好的，所以很纠结。我们拿菌液提质粒有，只是不很多。再答

对于真核生物来说,基因组文库包含了这种生物体内的所有基因（包括外显子、内含子和非编码区),而cDNA文库只是包含了所有基因中的一部分,因为cDNA文库来源于这种生物体内的mRNA的逆转录,而mRNA实

cDNA由mRNA逆转录出一条链,再按照互补原则扩增出另一条链,从而形成双链DNA.与基因组相比,cDNA不包括非编码区的序列,也不包括内含子的序列,因此全长cDNA序列要比基因组序列少.

cDNA是双链DNA.其中cDNA第一链是和mRNA互补的,另一链是相同的.再问：请问NCBI上的cDNA序列，列出的是和mRNA相同的吗？我查了一个基因，显示cDNA只和mRNA内的部分相同。cDN

cDNA克隆是以mRNA为原材料,经体外反转录合成互补的DNA(cDNA),再与载体DNA分子连接引入寄主细胞.每一cDNA反映一种mRNA的结构,cDNA克隆的分布也反映了mRNA的分布.特点是：①

cDNA文库是用mRNA逆转录得到的DNA,只含有编辑对应蛋白质的信息,没有控制该基因表达的相关元件（启动子、终止子、增强子）,也没有内含子.因此,cDNA文库的基因没有启动子和终止子.

首先明确一个问题,你的这个酶切位点在这个质粒中是唯一的吗,也就是说你只想把这个质粒切开吗?看你的结果好象这种可能性大些,那样我觉得最有可能是梅切不完全,即切开的线形质粒会比未切开的质粒跑得慢但两条带很

1）若是直接知道该蛋白质中氨基酸的序列,可以用来推测氨基酸中的碱基序列,并用化学合成仪直接合成该cDNA2)用该基因转录出的mRNA进行逆转录3）用鸟枪法直接从原核生物体内分离

没明白……cDNA作为互补DNA,就是以mRNA为模板通过RT-PCR合成得到的.所以,PCR产物在核酸电泳EB染色之后应该显示cDNA条带才对.你若问什么没得到这样的条带,那么很可能是你引物设计的问