双酶切后凝胶电泳没条带

变性了有利于去除蛋白的非特异性吧,

当然不一定,比如说你的目的基因的copynumber高或者PCR的效率高都会使得beta-actin的条带不如目的基因的条带亮

两者原因,可能是PCR体系没设计好,或者是胶没制好,跑电泳时注意保持电流恒定再问：多谢指教！跑电泳时我用的是恒功率，这个影响会很大吗？最近在做SSR标记有点迷茫！

聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法.在这种支持介质上可根据被分离物质分子大小和分子电荷多少来分离.聚丙烯酰胺凝胶有以下优点：①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N,N'甲叉双丙烯酰胺

RNA跟DNA不一样,主要现象就是降解1.提取过程中RNA出现降解2.洗脱的时候洗掉了3.18S有部分降解4.弥散带说明降解严重,杂质过多5.28S部分降解RNA完美提出来的话应该是三条带：28,18

第一：你这个胶跑的时间太久了!第二：你这个模板加的太多了!第三：你这个酶加的太多!第四：你的模板可能纯度不高如果以上问题都解决了还是没有改变,你可以考虑重新设计合成引物了再问：谢谢您，我排除时间一下时

你这个有可能是1脱色不全建议再脱色一会2如果跑的是总蛋白的话,有可能会出现连续的蓝色条带.3蓝白相间的竖条纹?我猜这是横条纹吧……再问：是竖条纹，不是横着的条带。还有有时样品前沿跑不到一条线上，怎么回

ItseemsthatyoudohaveDNAinyourmiddlelane(高盐低pH法?),buttheamountismuchlessthatothers.ODreadingonlyindic

首先确认你的LoadingBuffer中的溴酚蓝有没有跑出去.另外,不知你是跑的场强多大,如果是Mini胶的话216V,跑一个半小时肯定是跑出去了.

聚丙烯酰胺有分子筛效应和电泳效应,而SDS不具有再答：电泳效应

发个照片看看.

你这到底是切过了还是没切就跑胶啊.再问：我这个是作对照的，因为酶切时切不出来，所以做了这个，结果就这样了。再答：如果不是胶的染料问题就是回收的问题咯回收完测浓度没啊再问：测了，浓度有点低。但是我做双酶

“从头拖到尾,另外一对引物就能做出来”说明不是引物之间形成二聚体,而是第一对引物的设计有问题（特异性很差）.如果一定要扩增那个区,建议引物的位置向两边放一放.如果你没有好的设计软件,建议到Primer

那要看你的目的基因具体的来源,大小级别的特性.TAE和别的缓冲液什么的,也有些影响,还有就是胶浓度,跑胶时候的电压控制什么的.

可能原因：1.取样不够2.操作过程中机械损伤3.缓冲液加量不够4.凝胶未完全融化

PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来的东西跑个胶看一看.如果抽出来了,但是PCR没跑出来,就把模板浓度降低一下；如果DNA没跑出来,就要从抽提步骤上找问题.你们用

共显性：说白了就是可以分辨出纯合的跟杂合的这个有图示比较好理解.http://hi.baidu.com/%B6%E01%C9%E3%CA%CF%B6%C8%C8%C8%B0%AE/album/item

转膜有问题吗?转膜时那些条带有气泡产生吗?请问你做了这些样品对应的actin内参了吗?丽春红染色显示的条带怎样?若内参没问题,是不是你加底物没有弄均匀?你的一抗和二抗什么条件?

如果引物序列,PCR体系,程序,以及所用的物种都和文献一样的话,可考虑两种情况：1.你所参考的文献真实度有待考量.2.你所提取的该物种DNA质量不好.需重新提纯.

greenview没用过,只用过EB.我不在甲醛胶里加EB,好像那样背景比较高.我都是在变性RNA时在RNA loading buffer里加EB,胶上没什么背景.你先试一下看看吧